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　　?化妝品細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)的主要目的是檢測(cè)化學(xué)物質(zhì)是否具有致突變性，即檢測(cè)其是否會(huì)引起基因突變的能力?。這種試驗(yàn)通常被稱(chēng)為Ames試驗(yàn)，是由美國(guó)科學(xué)家布魯斯·艾姆斯在1970年代開(kāi)發(fā)的?。

　　細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)利用特定類(lèi)型的突變菌株，這些菌株攜帶有特定的基因突變，導(dǎo)致它們不能在沒(méi)有外源性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。通過(guò)將這些菌株暴露于測(cè)試化合物中，如果該化合物具有致突變性，它會(huì)誘導(dǎo)這些突變菌株產(chǎn)生基因回復(fù)突變，使其重新獲得在無(wú)外源性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的能力。因此，通過(guò)檢測(cè)這些回復(fù)突變菌株的生長(zhǎng)情況，可以評(píng)估化合物的致突變性?。

　　化妝品細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)方法步驟

　　1.?菌株準(zhǔn)備?

　　選取具有已知突變的鼠傷寒沙門(mén)氏菌或大腸桿菌菌株，這些菌株通常是組氨酸或色氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型?。

　　2.?培養(yǎng)基準(zhǔn)備?

　　準(zhǔn)備缺乏特定氨基酸（如組氨酸或色氨酸）的選擇性瓊脂培養(yǎng)基?。

　　3.?化合物處理?

　　制備待測(cè)化合物的不同濃度溶液，通常還包括陽(yáng)性對(duì)照（已知致突變物）和陰性對(duì)照（不含致突變物）?。

　　4.?預(yù)實(shí)驗(yàn)?

　　對(duì)未知或懷疑對(duì)試驗(yàn)菌株有抑制作用的試驗(yàn)樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，評(píng)估樣品是否有細(xì)胞毒性。如有抑制作用，則需對(duì)試驗(yàn)樣品進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)敝琳业綗o(wú)細(xì)胞毒性的濃度范圍?。

　　5.?主試驗(yàn)?

　　?菌株培養(yǎng)?：將冷凍保存的菌株培養(yǎng)物接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，培養(yǎng)至對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期?。

　　?頂層培養(yǎng)基準(zhǔn)備?：融化頂層培養(yǎng)基，并將其分裝于無(wú)菌小試管中?。

　　?混合與培養(yǎng)?：在保溫的頂層培養(yǎng)基中加入試驗(yàn)菌株的新鮮菌液、試驗(yàn)樣品浸提液（或陰性、陽(yáng)性對(duì)照液）以及代謝活化劑（如S9混合物），混勻后迅速傾倒在底層培養(yǎng)基上，靜置凝固?。

　　?培養(yǎng)與觀察?：將培養(yǎng)皿放入培養(yǎng)箱中，在適宜溫度（通常是37℃）下培養(yǎng)48-72小時(shí)，觀察并記錄菌落生長(zhǎng)情況?。

　　6.?結(jié)果判讀?

　　?陽(yáng)性結(jié)果?：如果暴露于待測(cè)化合物的菌株產(chǎn)生的反向突變菌落數(shù)量顯著多于陰性對(duì)照，則該化合物被認(rèn)為是致突變的?。

　　?陰性結(jié)果?：如果沒(méi)有顯著增加的反向突變菌落，化合物被認(rèn)為是非致突變的?。