
皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)基本流程包括哪些


皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)的主要目的是檢測(cè)某種物質(zhì)在重復(fù)接觸后是否會(huì)引起皮膚變態(tài)反應(yīng)及其強(qiáng)度?。這種試驗(yàn)通常用于評(píng)估化妝品、消毒劑或其他產(chǎn)品及其原料對(duì)皮膚的潛在影響?。
皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)方法概述
局部封閉涂皮試驗(yàn)(Buehlertest,BT)和豚鼠最大值試驗(yàn)()guineapigmaximisationtest,GPMT)是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物通過多次皮膚涂抹(誘導(dǎo)接觸)或皮內(nèi)注射受試物10d~14d(誘導(dǎo)階段)后,給予激發(fā)劑量的受試物,觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,并與對(duì)照動(dòng)物比較對(duì)激發(fā)接觸受試物的皮膚反應(yīng)強(qiáng)度。
小鼠局部淋巴結(jié)分析試驗(yàn)(locallymphnodeassay,LLNA)是通過耳部給予實(shí)驗(yàn)動(dòng)物受試物,引起淋巴結(jié)的淋巴細(xì)胞增生,淋巴細(xì)胞增生與受試物劑量(過敏程度)成比例。利用放射性標(biāo)記方法,測(cè)定試驗(yàn)組與對(duì)照組淋巴細(xì)胞的標(biāo)記率,并進(jìn)行對(duì)比,獲得刺激指數(shù),評(píng)價(jià)致敏強(qiáng)度。
皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)基本流程
(1)?準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)動(dòng)物?:選用皮膚完好的健康白色豚鼠,雌雄各半,體重在200g~300g之間。將豚鼠隨機(jī)分為試驗(yàn)組、陰性對(duì)照組和陽(yáng)性對(duì)照組,每組動(dòng)物至少16只?。
(2)?誘導(dǎo)處理?:對(duì)試驗(yàn)組豚鼠,給予受試物誘導(dǎo)和激發(fā)處理。陽(yáng)性對(duì)照組給予陽(yáng)性致敏物(如2,4-二硝基氯苯)誘導(dǎo)和激發(fā)處理。陰性對(duì)照組僅給以受試物激發(fā)處理。誘導(dǎo)處理濃度允許引起皮膚輕度刺激反應(yīng),激發(fā)濃度低于誘導(dǎo)濃度,不得引起原發(fā)性刺激反應(yīng)。如果原液不引起皮膚刺激反應(yīng),誘導(dǎo)和激發(fā)均使用原液?。
(3)?皮膚處理?:在試驗(yàn)前24小時(shí),將豚鼠背部左側(cè)3cm×3cm范圍內(nèi)的毛發(fā)去除。取誘導(dǎo)濃度的消毒劑溶液(或原液)0.5ml(g),直接涂在2cm×2cm左側(cè)去毛皮膚上或滴于同樣大小的2層紗布上,再將其敷貼在左側(cè)去毛區(qū)。用一層無刺激塑料膜或油紙覆蓋,再用無刺激膠布固定,持續(xù)6小時(shí)。第7天至第14天進(jìn)行激發(fā)處理?。
(4)?激發(fā)處理?:經(jīng)過一定間歇期后,在動(dòng)物背部去毛皮膚給予激發(fā)劑量的受試物后暴露于一定劑量的紫外線(日光)下,觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物并與對(duì)照動(dòng)物比較對(duì)激發(fā)接觸受試物的皮膚反應(yīng)強(qiáng)度?。
(5)?觀察結(jié)果?:記錄并比較各組動(dòng)物的皮膚反應(yīng)強(qiáng)度,評(píng)估受試物的致敏性和光變態(tài)反應(yīng)的可能性?。
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